代谢组学的研究对象大都是相对分子量在1000以内的小分子物质,因此常用的血液样本在取样后,应小心操作,防止溶血,尽快分离出血清,分置于温环境下保存。由于用于病理实验的动物组织采集相对其他样品的采集,操作更繁琐,在处理过程中许多细节容易忽略,造成数据不完美(甚至不能用)。因此接下来将重点介绍组织样品采集的注意事项及其固定。组织样品采集注意事项组织应新鲜,操作时间尽可能短,否则细胞发生死后变化、自融及现象。是动物心脏还在跳动时采集,样本取出后在5分钟以内置于固定液内,避免长时间暴露在空气环境中。组织块尽量小而薄。组织块的厚度以不超过5mm为宜,较为理想的厚度为2mm左右,主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。勿使组织块受挤压。在采集过程中,应尽量选择较为锋利的手术器械,如手术刀片等,避免操作过程中挤压挫伤标本。挤压过的组织均不可用。固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜,组织能够在容器内自由移动。尽量保持组织的原有形态。新鲜组织经固定后,或多或少产生收缩现象(如胃肠),为此可将组织展平,以尽可能维持原形。保持组织清洁。组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用生理盐水冲洗。上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。普陀区疾病动物模型建模
麻醉小鼠,仰卧固定于实验台上,颈部去毛后酒精消毒,切开皮肤,逐层暴露气管,将1mL注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管,回抽无阻力,则注入博莱霉素5mg/kg/L(对照组注入等量的生理盐水)。手术完毕后迅速将动物直立、旋转,使药液在肺内分布均匀,动物清醒后常规饲养。4.2模型鉴定及后续检测:肺纤维化模型发展时间:给药后第7天肺组织大多呈重度肺泡炎改变,肺泡腔及肺间质内有大量中性粒细胞浸润,部分肺泡腔破坏或消失,肺间隔内成纤维细胞和增生,与正常肺组织对比差别明显;给药后第14天,肺纤维化开始形成。巨噬细胞、中性粒细胞等炎性细胞明显减少,成纤维细胞增多,肺泡间隔明显增厚,有胶原沉积。给药后第28天,多数小鼠发生弥漫性肺间质纤维化,肺间质被胶原纤维和成纤维细胞替代,肺泡壁破坏,肺大泡形成,但仍可见炎性细胞浸润。上海品牌疾病动物模型建模人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。
诱导模型实验动物:小鼠、豚鼠、大鼠造模试剂:烟雾、空气污染物及有害气体(PM2.5、臭氧、二氧化氮)、脂多糖、弹性蛋白酶获得方式:动物全身长时间放置在密闭容器内,暴露于烟雾、空气污染物或者有害气体;气管内滴注脂多糖或者弹性蛋白酶。模型特点:烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同;脂多糖造模时间短,可用来模拟急性加重反应,但不能反应慢性病变的过程,通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物:α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式:直接购买模型特点:α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型,更准确地理解易感基因的致病机制。
糖尿病动物模型(animalmodelofdiabetesmellitus)1、病毒诱发法:DBA/2雌性小鼠,皮下接种脑炎、心肌炎病毒M型变异株4~7d后出现明显的,伴有血中及胰腺中胰岛素含量降低。2、四氧嘧啶法:SD大鼠200g左右,雌雄不限,四氧嘧啶静脉注射1次,观察血糖>300mg/dl,持续2周可以认为造模成功。3、链脲菌素法:将链脲菌素在酸化生理盐水中溶解成1%溶液,给大鼠静脉注射。观察血糖>400mg/dl,持续3d即可认为是造模成功。4、高糖饲喂诱发法:选用SHR/NLHCP大鼠5周龄,喂饲含54%蔗糖饮食。动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。
设计了一套能够特异性标记“穆勒胶质细胞”的系统,再将能诱导神经细胞形成的基因编辑系统,包装成“病毒”,注射到小鼠的视网膜。约1个月后,研究人员在小鼠的视网膜视神经节细胞层,发现了由穆勒胶质细胞转分化而来的视神经节细胞。这些诱导而来的视神经节细胞,不仅可以对光刺激产生相应的电信号,还可以和大脑中正确的脑区建立功能性联系,将视觉信号传输到大脑,成功恢复视觉功能。进一步的研究还表明,通过这一基因编辑技术,还能将小鼠模型中特定区域的“星形胶质细胞”非常高效地转分化为多巴胺神经元。转分化而来的多巴胺神经元,能将帕金森模型小鼠的运动障碍,逆转到接近正常小鼠的水平。这项研究的负责人杨辉指出,尽管将胶质细胞转分化为神经元的基因编辑技术在实验室里取得重要进展,但要将研究成果真正应用于人类疾病的***,还有很多工作要做。人类的视神经节细胞能否再生?帕金森患者是否能通过该方法被***?研究人员今后将从小鼠模型转到灵长类模型,进一步深入研究。动物模型的意义和优越性!上海品牌疾病动物模型建模
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胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型一、服务信息1、动物模型名称:胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:200~220g6、实验动物环境:SPF级二、服务项目服务编号服务内容服务周期价钱DH2011胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型10周询价1、实验方法:用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分:0分:无明显病变;1分:呈局灶性分布,受累面积在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面积在30%-70%之间者;3分:呈弥漫性分布,受累面积在70%以上者。统计分析:每份标本在低倍视野(10×10)下依次选取左上、右上、左下、右下、中间5个视野(共)进行观察,测定并计算视野内小胆管伴纤维组织增生总面积。三、交付标准:1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。普陀区疾病动物模型建模
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